液相色譜儀的原理是利用不同待分離物質在兩相中的親和力差異，如分配系數(shù)、吸附容量等。利用外力，含有樣品的流動相(氣體、液體)通過固定在柱或平板上的固定相表面，該固定相與流動不相溶。當流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時，混合物中的組分與固定相相互作用。

　　液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的分辨率和靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題zui有前途的方法。由于HPLC具有分辨率、靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等點，因而被應用到生物化學、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領域。液相色譜儀與結構儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等；液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類，海水中的不揮發(fā)烴類，使環(huán)境污染分析得到的發(fā)展。

　　為了液相色譜儀使用的穩(wěn)定性，我們對于設備使用環(huán)境是有一定要求的，包括：通風、照明、供電、環(huán)境溫度和濕度以及潔凈度，其中：

　　1、通風：使用液相色譜儀分析過程中，由于流動相中含有揮發(fā)性有機溶劑（甲醇、乙睛等）會產(chǎn)生有害氣體，對儀器中的光學元件帶來腐蝕，應注意儀器室的通風，以排除室內有害氣體、保持空氣清。通風主要有兩種方式：一種自然通風，定時打開門窗，讓內外空氣對流;另一種是制通風，如用通風柜、排風扇等，及時將有害氣體排出室外。

　　2、照明：室內照明要光線適中，避免陽光直射。為避開直射光線對儀器操作、觀測的影響，儀器(顯示屏)應側向光線。實驗室窗戶要掛窗簾，以便隨時調節(jié)光照度。

　　3、供電：液相色譜室應設有照明電源和動力電源，動力電可供儀器運行使用。為減少噪音的干擾，儀器應遠離瞬時供電的大功率電器設備，如大型電動設備、電梯、空調系統(tǒng)等。為HPLC泵的晶度，必須要穩(wěn)定的輸人電壓，為此，建議色譜室應設有和儀器負荷相當?shù)姆€(wěn)壓電源。

　　4、環(huán)境溫度和濕度：適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運行、性能穩(wěn)定的必要條件。一般要求室溫在20一30℃之間，日溫度變化2一3℃，不要波動太大，否則，在開機分析時會影響色譜分離，夏季一定要控制室溫不要過30℃，溫度太會使流路系統(tǒng)產(chǎn)生氣泡，影響檢測器的正常工作（如熒光檢測器）。室內相對濕度應控制在60%以下。

　　5、潔凈度：懸浮于空氣中的顆粒物質會對色譜儀器分析帶來干擾，使本底和噪聲升，成為分析測試的污染源，直接影響純物質的純度與痕量雜質的分析。